Concentraciones de acido indolbutirico para la
formacion de raices en condiciones in vitro de
castaña (Bertholletia excelsa bonpl., Lecythidaceae)
https://doi.org/10.47230/unesum-ciencias.v7.n1.2023.660
Revista UNESUM-Ciencias
Volumen 7, Número 1, 2023
Universidad Estatal del Sur de Manabí
ISSN-e: 2602-8166
Concentrations of indolbutyric acid for the formation of roots
in in vitro conditions of chestnut (Bertholletia excelsa bonpl.,
Lecythidaceae)
REVISTA UNESUM-Ciencias
UNIVERSIDAD ESTATAL DEL SUR DE MANABÍ
Volumen: 7
Número: 1
Año: 2023
Paginación: 17-22
URL: https://revistas.unesum.edu.ec/index.php/unesumciencias/article/view/660
*Correspondencia autor: gabyluz862@hotmail.com
Recibido: 11/06/2022 Aceptado: 21/01/2023 Publicado: 28/02/2023
Ruth Gabriela Ancasi Espejo
1
https://orcid.org/0000-0002-7717-8400
José Armando Alcázar Vivado
2
https://orcid.org/0000-0003-4879-4092
Isrrael Muñoz Guzmán
3
https://orcid.org/0000-0002-2083-9423
1. Universidad Amazónica de Pando, Facultad de Ciencias Biológicas de Naturales, Laboratorio de Biotecnología, Carrera de Biología,
Pando, Bolivia.
2. Universidad Amazónica de Pando, Centro de Investigación y Producción para la Amazonía, Pando, Bolivia.
3. Universidad Amazónica de Pando, Pando, Facultad de Ciencias Biológicas de Naturales, Laboratorio de Biotecnología, Pando, Bolivia.
RESUMEN
La castaña (Bertholletia excelsa Bonpl., Lecythidaceae) es una de las especies no maderables predominan-
tes en la Amazonía boliviana. La reproduccion asexual in vitro es una alternativa para las especies forestales
para incrementar la tasa de multiplicación en un corto período de tiempo, y lograr plántulas de alta calidad. El
problema más critico en condiciones in vitro es el enraizamiento en las plantas forestales debido a la emisión
de raíces que existe en el desbalance hídrico entre la transpiración y absorción de agua. El experimento fue
implementado en un diseño completamente aleatorio con doce tratamientos con deferente concentraciones
de AIB (0; 0.1; 0.5; 1.0 1.5 ; 2 mg/L) y dos medios distintos con sales minereles con 4.33 g/L(MS; WPM );con
suplemento de sacarosa 30 g.L-1 g, el pH ajustado para 5,7 ± 0,1, solidificado con 2 g.L
-1
de Phytagel. Los
resultados permitieron concluir que las dosis de 0.5 y 1.0 mg.L
-1
AIB presentan formaciones de raices en con-
diciones in vitro para la propagacion de cataña.
Palabras clave: No Maderable, Sexual, Especie Forestal, Emisión.
ABSTRACT
Chestnut (Bertholletia excelsa Bonpl., Lecythidaceae) is one of the predominant non-timber species in the
Bolivian Amazon. In vitro asexual reproduction is an alternative for forest species to increase the multiplication
rate in a short period of time, and achieve high quality seedlings. The most critical problem in in vitro conditions
is rooting in forest plants due to the emission of roots that exists in the hydric imbalance between transpiration
and water absorption. The experiment was implemented in a completely randomized design with twelve treat-
ments with different concentrations of IBA (0; 0.1; 0.5; 1.0 1.5; 2 mg/L) and two different media with mineral
salts with 4.33 g/L(MS; WPM); with 30 g.L
-1
g sucrose supplement, the pH adjusted to 5.7 ± 0.1, solidified with
2 g.L
-1
of Phytagel. The results allowed us to conclude that the doses of 0.5 and 1.0 mg.L-1 IBA present root
formation in in vitro conditions for the propagation of Chestnut.
Keywords: Non-timber, Sexual, Forest Species, Emission.
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REVISTA UNESUM-Ciencias Volumen 7, Número 3, 2023
Introducción
La castaña (Bertholletia excelsa Bonpl., Le-
cythidaceae) es una de las especies no ma-
derables que se encuentran en la Amazonía
boliviana, peruana, venezolana y brasilera,
de importancia económica en estos países
y es uno de los productos que contribuye
a aumentar el PIB local y generar empleos
durante todo el proceso de extracción. y
comercialización en áreas urbanas y rura-
les (Ninán y Rangel, 2010). Además, con-
tribuye a un impacto ambiental positivo de-
bido a la conservación de los bosques y al
bioma amazónico (Ortíz, 2002; Guariguata
et al., 2017). Su valor alimenticio se debe
a que tiene e vitaminas, minerales, ácidos
esenciales, que son fuentes de compues-
tos bioactivos beneficiosos para la salud
humana cuando se consumen regularmen-
te (Costa et al., 2010; Freitas et al., 2010;
John et al., 2010; Ros, 2009; Jenkins et al.,
2008; Joan et al., 2006; Ros et al., 2006). La
micropropagación in vitro es una alternati-
va para las especies forestales que tienen
problemas de germinación, permitiendo la
producción de plántulas sanas y vigoro-
sas en grandes cantidades y producidas
en condiciones asépticas, constituyendo
una alternativa económica apropiada para
la producción de plántulas (Pinhal, et al.,
2011; Pelegrino, et al., 2013). En la casta-
ña la fase de aclimatación in vitro es la más
crítica, donde el enraizamiento in vitro juega
un rol fundamental. En esta etapa durante la
emisión de las raíces existe el desbalance
hídrico entre la transpiración y absorción de
agua. (Sathyanarayana y Barghese, 2007).
Para acelerar este proceso se recurre a la
adición de auxinas, entre éstas el ácido in-
dol 3-butírico (AIB) (Rai et al., 2009), ácido
indol 3-acético (AIA) (Jain y Babbar, 2000)
y ácido naftalenacético (ANA) (Shah et al.,
2008). El objetivo de este trabajo fue eva-
luar diferentes medios de cultivo en la fase
de enraizamiento in vitro de cataña (Bertho-
lletia excelsa Bonpl., Lecythidaceae).
Desarrollo
Unicación
La investigación fue desarrollada en el labo-
ratorio de biotecnología vegetal de la Facul-
tad de Ciencia Biología de la Naturales de la
Universidad Amazónica de Pando, Bolivia.
Diseño experimental
El experimento fue implementado en un di-
seño experimental completamente aleatorio
con doce tratamientos con diferentes con-
centraciones de AIB (0; 0.1; 0.5; 1.0 1.5 ; 2
mg/L) y dos medios de cultivo distintos (MS;
WPM ).
Metodología
Se realizó la limpieza de exceso de oxida-
ción del explante in vitro de castaña. sub-
dividiendo los meristemos y se inoculó en
un medio de cultivo constituido de sales
minerales y vitaminas de MS y WPM, (4.43)
y con suplemento de sacarosa 30 g.L-1 g
con adición de Auxinas (AIB ) con concen-
traciones distintas (0; 0.1; 0.5; 1.0 1.5; 2
mg/L) (Tabla 1), el pH fue ajustado para
5,7 ± 0,1, solidificado con 2 g.L-1 de Phyta-
gel, que luego fueron distribuidas en tubos
de ensayo de 25 x 150 mm donde se dis-
pensaron 15 mL del medio de cultivo, se
sellaron con tapas de plástico y se esteri-
lizaron en autoclave marca Quimis, Mod.
Q216F20HV a una temperatura de 120 ºC
a 1 atm de presión durante 15 minutos, los
tratamientos fueron diseñados en un experi-
mento factorial 6 x 2, con diez repeticiones.
El periodo de incubación mostró que en
tiempos mayores de 20 a 35 días hubo pre-
sencia de raíz en la especie. Las variables
de evaluación fueron la formación de raíz,
número de raíces, longitud de raíz y número
de hoja.
ARTÍCULO ORIGINA: CONCENTRACIONES DE ACIDO INDOLBUTIRICO PARA LA FORMACION DE RAICES EN
CONDICIONES IN VITRO DE CASTAÑA (BERTHOLLETIA EXCELSA BONPL., LECYTHIDACEAE)
REVISTA UNESUM-Ciencias Volumen 7, Número 3, 2023
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Análisis estadístico
Los resultados de las variables de respeu-
esta fueron sometidos a la verificación de la
presencia de valores atípicos por la prueba
de Grubbs (1969). Para la normalidad de
los residuos se hizo la prueba de Shapiro
- Wilk (1965), asimismo la homogeneidad
de las varianzas. Luego se procedió con al
análisis de varianza (ANOVA) utilizando el
Proc GLM y Mixed del SAS (SAS, 2004).
En la Tabla 3 se observa que la castaña tien-
de a enraizar. Asimismo, hubo dependencia
de la adición exógena del regulador de cre-
cimiento. Las variables correspondientes
a longitud y número de raíz y hojas no se
vieron afectadas. Las concentraciones de
Tabla 1. Tratamientos en fase de enraizamiento.
Tabla 2. Análisis de varianza para enraizamento in vitro de castaña (Bertholletia excelsa).
ns
no significativo (p>0.01); * significativo a 5% (p<0.05); ** significativo a 1% (p<0.01).
Medios de cultivo Ácido indolbutírico (mg/L)
WPM
0
0.1
0.5
1
1.5
2
MS
0
0.1
0.5
1
1.5
2
Resultados
En el análisis de variancia (ANOVA) se ob-
servó que no hubo efecto de la interacción
entre medios de cultivo y concentraciones
de auxinas para las variables formación de
raíz, número de hoja, longitud de raíz y nú-
mero de hoja (p<0,05). Asimismo, se obser-
vó que hubo diferencias significativas en la
concentración de auxinas para la formación
de raíz. Asimismo, no hubo diferencias sig-
nificativas al p<0.05 de probabilidad con
las otras variables (Tabla 2).
F.V Cuadrados medios
Formación
de raíces
No. de raíces
Longitud de
raíces (cm)
No. de hojas
Concen. Auxinas(CA) 9.01* 0.7ns 5.2ns 10.6ns
Medio cultivo (MC) 8.17 ns 4.3ns 4.6ns 5.6ns
CA*MC 1.05ns 1.02ns 1.5ns 0.05ns
CV (%) 25.88 15.24 13.6 23.2
AlB entre 0.5 y 1.0 mg/L mostraron el ma-
yor porcentaje de enraizamiento, mientras
que mayores concentraciones tendieron a
disminuir la longitud de raíz; adicionalmen-
te, se presentó la formación de callos en
la base de los tallos. Fue evidente que, los
Ancasi Espejo, R. G., Alcázar Vivado, J. A., & Muñoz Guzmán, I.
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REVISTA UNESUM-Ciencias Volumen 7, Número 3, 2023
porcentajes de enraizamiento in vitro son
muy bajos, particularmente si se requiere
propagar masivamente esta especie fores-
tal no maderable.
Discusión
En la producción in vitro de plantas, gran
parte del éxito depende del proceso de
aclimatización; al respecto, se menciona
que la formación de raíces adventicias en
los explantes es el factor limitante. EI enrai-
zamiento puede ocurrir en condiciones in
vitro o ex vitro, dependiendo de la disponi-
bilidad de la respuesta morfogénica de los
brotes radiculares. Por otra parte, las raíces
adventicias formadas in vitro desarrollan
características anatómicas y morfológicas
particulares, inducidas por las condiciones
del medio de cultivo. La adición al medio de
cultivo de auxinas, por lo general, en forma
de AIB o Ácido naftalenacético (ANA), ha
sido una práctica general para inducir la for-
mación de raíces in vitro en coníferas (Nie-
mi et al., 2002). En la presente investigación
se utilizó AIB, que a las concentraciones de
0.5 a 1 AIB (mg/L) presentó mayor emisión
de raíz. En numerosos trabajos realizados,
se utilizaron AIB en concentraciones de 0.1
a 1000 mg L-1, en los cuales se obtuvieron
mejores emisiones radiculares (Tang y Ou-
yang, 2000; Parasharami et al., 2003; Zhang
et al., 2006).
Asimismo, Latsague (2008), encontró un
87% de enraizamiento en tecas semileño-
sas con una concentración 1.000 mg L-1 de
AIB. De la misma manera, Sánchez (2011),
Tabla 3. Efectos de las concetraciones de Ácido Indobutírico para la formacion de ratices
in vitro de castaña (Bertholletia excelsa).
AIB (mg/L) Enraizamiento (%) No. Raíces Longitud raíces (cm) No. Hojas
0 15.5 c 3.0 1.5 4.0
0.1 17.5 c 3.0 1.5 4.0
0.5 50.0 a 4.0 1.5 3.0
1 55.0 a 4.0 1.6 4.0
2 35.0 b 3.0 1.3 3.0
C.V (%) 15.5 17.0 20.03 18.02
Medias con la misma letra no son diferentes entre sí.
trabajo en la propagación vegetativa in vitro
de cuatro especies forestales utilizando la
dosis de AIB para el enraizamiento de cedro
(Cedrela odorata L.), caoba (Switenia ma-
crophylla King), macuilis (Tabebuia rosea
Bertol) y guayacán (Tabebuia chrysanta).
Las concentraciones evaluadas fueron de
0, 500, 1000 y 1500 ppm respectivamente.
Conclusiones
Las plantas con concentraciones de 0.5 y
1.0 mg. L-1 AIB son una buena alternativa
para el enraizamiento de raíces en condi-
ciones in vitro para la propagación de cas-
taña
Agradecimientos
Se agradece el financiamiento de esta in-
vestigación al Fondo Nacional de Desarro-
llo Forestal (FONABOSQUE) y a la Universi-
dad Amazónica de Pando. Se agradece la
gestión y operatividad de la investigación al
Centro de Investigación y Producción para
la Amazonía (CIPA) de la Facultad de Cien-
cias Biológicas y Naturales de la Universi-
dad Amazónica de Pando. Asimismo, nues-
tros agradecimientos al Dr. Julio Gabriel
Ortega por la revisión y contribución para la
mejora de la presente publicación.
ARTÍCULO ORIGINA: CONCENTRACIONES DE ACIDO INDOLBUTIRICO PARA LA FORMACION DE RAICES EN
CONDICIONES IN VITRO DE CASTAÑA (BERTHOLLETIA EXCELSA BONPL., LECYTHIDACEAE)
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Cómo citar: Ancasi Espejo, R. G., Alcázar Vivado, J. A.,
& Muñoz Guzmán, I. (2023). Concentraciones de aci-
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Ancasi Espejo, R. G., Alcázar Vivado, J. A., & Muñoz Guzmán, I.